苦杏仁主要含有苷類、脂肪油、揮發(fā)油、黃酮類及氨基酸類等成分。揮發(fā)油是苦杏仁具有特殊氣味的主要來源。為了明確不同傳統(tǒng)炮制工藝對(duì)苦杏仁揮發(fā)性成分的影響規(guī)律，本文采用Heracles Ⅱ超快速氣相電子 揮發(fā)性成分分析
鼻（FGC E-Nose）檢測(cè)苦杏仁及炮制品的揮發(fā)性成分，運(yùn)用多種化學(xué)計(jì)量學(xué)方法進(jìn)行區(qū)分鑒別，明確不同炮制品揮發(fā)性成分的差異。
藥物與試劑
苦杏仁、nC6-nC16正構(gòu)烷烴標(biāo)品
HeraclesⅡ超快速氣相電子鼻
供試品的制備
苦杏仁炮制品制備，將18個(gè)樣品（6個(gè)炮制方法×平行炮制3份）粉碎，過2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)藥篩，平行制備3份，備用。
超快速氣相電子鼻實(shí)驗(yàn)參數(shù)
色譜柱：非極性色譜柱MXT-5，弱極性色譜MXT-1701，分析參數(shù)見表1。
氣味成分定性
采用nC6-nC16正構(gòu)烷烴標(biāo)品進(jìn)行校準(zhǔn)，將保留時(shí)間轉(zhuǎn)化為保留指數(shù)，通過Kovats保留指數(shù)定性，用AroChembase數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)化合物進(jìn)行分析。
采用nC6-nC16正構(gòu)烷烴標(biāo)品進(jìn)行校準(zhǔn)，將保留時(shí)間轉(zhuǎn)化為保留指數(shù)，通過Kovats保留指數(shù)定性，用AroChembase數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)化合物進(jìn)行分析。
采用FGC E-Nose對(duì)苦杏仁及不同炮制品揮發(fā)性成分進(jìn)行分析，通過Kovats保留指數(shù)定性，并與AroChembase數(shù)據(jù)庫(kù)信息進(jìn)行對(duì)比，獲得苦杏仁及其炮制品可能的揮發(fā)性成分如表2?？嘈尤始安煌谥破分泄茶b定出37種可能的揮發(fā)性成分，包括醇類10種、醛類8種、酸類4種、酯類4種、烴類4種、吡嗪類4種成分及其他類3種成分。SP、SZ、CZ、CHAOZ、MZ和FZ樣品中檢測(cè)出揮發(fā)性成分?jǐn)?shù)量分別為13、7、14、17、18和16種。其中，生品和5種炮制品共同的揮發(fā)性成分為乙醇、苯甲醛和苯乙醛。
化學(xué)模式識(shí)別分析
聚類熱圖分析
對(duì)苦杏仁及炮制品的37種揮發(fā)性成分進(jìn)行聚類熱圖分析。如圖1所示，聚類分析結(jié)果表明苦杏仁生品及其不同炮制品可各自聚為一類。熱圖結(jié)果表明苦杏仁和5種炮制品的氣味成分存在明顯差異。SZ樣品中絕大部分揮發(fā)性成分的含量降低。經(jīng)高溫加熱，增加了24種揮發(fā)性成分，且大多數(shù)揮發(fā)性成分含量升高。
PCA分析
以54個(gè)樣品（6個(gè)炮制方法×平行炮制3份×平行制備3份）的37個(gè)共有峰為變量，建立PCA模型。在PCA模型中，前5個(gè)主成分的R2X（cum）為87.8%，Q2（cum）為78%，說明所建立的模型具有良好的解釋和預(yù)測(cè)性能，并且能夠反映絕大部分?jǐn)?shù)據(jù)信息。如圖2所示，PCA模型得分圖顯示苦杏仁及各炮制品樣品之間界限清晰，可按照炮制方法區(qū)分。
PLS-DA分析
根據(jù)PCA模型分類結(jié)果，按照不同炮制方法將樣品分為6類，建立PLS-DA模型。在PLS-DA模型中，前7個(gè)主成分R2X（cum）為99.4%，R2Y（cum）為97.9%，Q2（cum）為97.1%，說明所建立的模型性能良好。如圖3所示，PLS-DA模型得分圖顯示生品和5種炮制品各自聚為一類，表明不同炮制方法可顯著影響苦杏仁的揮發(fā)性成分。
ANN分析
以54個(gè)樣品的37個(gè)共有峰（54×37矩陣）為輸入層，以6種炮制品為輸出層，將樣品隨機(jī)分為訓(xùn)練集（70%）和驗(yàn)證集（30%），采用多層感知器方式進(jìn)行預(yù)測(cè)。ANN模型的判別結(jié)果如表3所示，ANN能夠正確識(shí)別訓(xùn)練集和驗(yàn)證集樣品，說明此模型對(duì)苦杏仁及炮制品的快速鑒別具有較高的準(zhǔn)確率，可對(duì)苦杏仁及5種炮制品進(jìn)行快速、客觀、準(zhǔn)確的種類判別。
差異標(biāo)志物的確定
PLS-DA模型獲得變量重要性投影，結(jié)果如圖4所示。以VIP值＞1的變量為差異標(biāo)志物，分別為苯乙醛、苯甲醛、乙醇、吡嗪、異丙醇、3-甲基-1-丁醇和2-甲基丁醛。差異標(biāo)志物相對(duì)含量如表4所示，與SP比較，苯乙醛的相對(duì)含量在SZ、CHAOZ、MZ和FZ樣品中顯著降低（P<0.01），在CZ樣品中顯著升高（P<0.01）；苯甲醛的相對(duì)含量在SZ和CZ樣品中顯著降低（P<0.05，P<0.01），在CHAOZ、MZ和FZ樣品中顯著升高（P<0.01）；乙醇的相對(duì)含量在CZ、MZ和FZ樣品中顯著降低（P<0.01），在SZ和CHAOZ樣品中顯著升高（P<0.01）。經(jīng)炮制加工后，3-甲基-1-丁醇消失，但產(chǎn)生了吡嗪、異丙醇和2-甲基丁醛，與SP比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
本研究通過Heracles Ⅱ FGC E-Nose分析苦杏仁生品及其炮制品的揮發(fā)性成分，結(jié)果顯示苦杏仁生品與各炮制品揮發(fā)性成分的組成和含量存在一定差異。苯甲醛、苯乙醛和乙醇為共有成分，且相對(duì)含量較高。苯甲醛是苦杏仁具有苦杏仁氣味的主要來源，在CHAOZ、MZ和FZ樣品中苯甲醛含量較高。吡嗪類成分主要是在烘烤過程中發(fā)生Strecker反應(yīng)降解形成，加熱可促進(jìn)其生成。苦杏仁經(jīng)炒制、蜜制或麩制后產(chǎn)生了吡嗪、乙基吡嗪、2,3-二甲基吡嗪和2,3,5-三甲基吡嗪。MZ樣品中還產(chǎn)生了具有花香味的成分芳樟醇，可能是加入輔料蜂蜜的原因。
本研究發(fā)現(xiàn)苦杏仁經(jīng)高溫炒制和蜜制后，苯甲醛含量顯著升高，通過簡(jiǎn)便快速的FGC E-Nose結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)明確了不同炮制工藝對(duì)苦杏仁揮發(fā)性成分的影響，高溫炮制增加了揮發(fā)性成分的組成和含量，去油制霜損失了大部分揮發(fā)性成分，這很可能是炮制發(fā)揮了“減毒增效”作用的關(guān)鍵因素。 
